2021年结直肠癌分子探测高通量测序中国专家共识发布，要点一览！

珠直肝癌在必将的发病呈近年来上升的近来，世 界卫生组织起来国际间肺癌研究机构(International Agency for Research on Cancer，IARC)类似数据推断，必将 2020 年珠直 肝癌的上新发病例数为 56 万例，因珠直肝癌被害病例达 29 万例 。 约 25%的珠直肝肺癌状在检检验时已出现近 处转移，此外，25%的症状在病患全过程之中发生转移，晚期 症状预后较差，5 年生存率不头 15%。 分子；也警 测量是筛选靶向病患预见人群的应该，近年来随着的集品 高效率的飞速发展，测量序遗传物固，也专指下一代遗传物固( next generation sequencing，NGS)，因其在辐射能、如此一来本及效率 等总体的效合压倒持续性，在蛋白质变异的集品之中展现出越加 来越加广阔的不必用前景。 然而 NGS 的集品高效率时序比较简单， 对研究室环境条件、人员能力及精确度管理要求高，任何 一个环节出现情况，都会制约的集品珠果的准确度，进而制约药理学决策。

为保证药理学医疗工作的准确度和规章持续性，本认同由药理学医师珠合珠直肝癌实际医疗需求发起者，业内诸多的集品公司参与，病理及警检验专家指导工作，从珠直肝癌 NGS 的集品的药理学本固及研究室时序固控本固共同起草之中国专家认同，以指导工作 NGS 的集品高效率在珠直肝癌医疗之中的规章不必用。

1，人类；也在珠直肝癌之中的药理学含意

目前较完全一致的肝癌相山海遗传持续性疾病主要有 3 类:Lynch 肉瘤、家族持续性腺糙肉病 ( familial adenomatous polyposis，FAP）和黑斑皱纹病（P⁃J 肉瘤）。 同时《之中国药理学学会 ( CSCO) 珠直肝癌医疗范本 2020 原版》 针对遗传持续性珠直肝癌化疗和蛋白质检检验拟订了原则。

FAP 举荐进行时 APC 氨基酸遗传物固/段落有缺陷遗传物固，有变异提示 FAP 或震荡改进型 FAP(AFAP);无变异 则举荐行 MUTYH 氨基酸遗传物固 / 段落有缺陷遗传物固，有牙 变提示 MUTYH 相山海皱纹病(MUTYH⁃associated pol⁃ yposis，MAP)。 对于无任何未知的皱纹病肉瘤蛋白质 的病原持续性变异，首选多蛋白质变异的集品，多蛋白质 Panel 不必还包括所有皱纹和珠直肝癌相山海蛋白质。

珠直肝癌之中常见 TMB 辨识方法有及的集品以内汇总

TMB 的集品有助于帮助筛选仍要疫病患潜在获 勤的症状，显著提升晚期恶持续性症状的客观缩 解率和总生存期。 MSI⁃H/dMMR 一般来说也伴随 TMB⁃H，MSI⁃H 抽的集之中有约 83%同上现为 TMB⁃H，且有 97%的抽的集 TMB≥10 Muts/ Mb。 在药理学研究和实证全过程之中，TMB 的评核辨识国际标准 在不同癌种之中假定差异，而不同靶向遗传物固 Panel 的 TMB 的集品体系之间 TMB 阈值不能通用。

症状拟订相山海病患方案的全过程，珠合珠直肝癌人类；也相山海药理学含意，建言的集品作如下举荐 ：

2，抽的集执行及水路

FFPE 抽的集为保证遗传物固精确度，外科手术或活警

组织起来不必在离体 30 min 内浸入到 100 ml 的 4%甲 醇和溶容器之中进行时分开，避祸仍要常用酸持续性及含有重金属 离子的分开容器。 其之中，大骨骼分开整整为 6 ~ 48 h，不超过 72 h;小活警体可分开 6 ~ 12 h。 对 其之中 1 张 FFPE 抽的集进行时基底染色，并在全像 下观察蛋白的甜度和数量。 若甜度不 头，则研究室只能对通过可溶持续性后不符精确度要求的 骨骼进行时评核，或者制备如此一来 FFPE 蛋白学蜡块后 进行时遗传物固提取。 值得注意的是，开展 NGS 的集品前 不必通过 HE 染色评核蛋白甜度，至少满头疮 糙蛋白甜度在 20%以上。

外科手术或活警的食材组织起来抽的集

食材组织起来可提取到高精确度的遗传物固。 食材组织起来不必在离体 30 min 内 将其保有于容器氮罐或者-80 °C 洗衣机之中，尽量减少 RNA 等 遗传物固降解。 如需评核蛋白甜度，可辅以用冰山冻布 片生殖细胞方法有，若蛋白甜度不头，可通过标示出 区域进行时可溶持续性。 食材组织起来可在容器氮、-80 °C 冰山 罐或稳定剂之中长期保有。

血浆抽的集

对于假定于血浆之中的气化 DNA， 即 ctDNA，抽的集时可常用仅供的 ctDNA 保有管辅以血， 辅以血后婉转颠倒 8 ~ 10 次，确保辅以血管之中的 ctDNA 保有容器与肾脏充分混匀，容器态水路保有方能，严加 冻融肾脏;到达研究室后，裂解血浆，提取基固 DNA[26] 。 也可常用一次持续性 EDTA 抗凝密闭辅以血管， 辅以集 8 ~ 10 ml 全血，冷藏运输，2 h 内裂解血浆，提 取基固 DNA，如需保有，请放到-80 °C 洗衣机之中，并避祸 仍要反复冻融。

抽的集运载规章

送国际标准加载规章( SOPs) 以确保运载全过程之中各类的集 本的安全持续性和全过程的可控持续性(详见第 4 节)。 润滑油 涂料可以容器态运输，肾脏抽的集只能在的水山条件下运 输，遗传物固抽的集需在 4 °C或冰山冻条件下运输。

3，调查报催促解读及国际标准堆栈

NGS 药理学调查报催促包含内容

蛋白质的集品的药理学报 催促不必当还包括:(1)框架资讯:研究室名称、科学研究操 作人员、调查报催促审核人员、联系方式。 (2)受警者的 理论上资讯:不必还包括受警者姓名、持续性别、出生迟于、 接受的集品的迟于、的集品的目的和受警者的药理学指 征等。 (3)抽的集的资讯:抽的集类改进型，如 DNA、外周血、尿容器、食材组织起来、FFPE 组织起来等;辅以集整整和辅以 集部位、抽的集E、送警整整、的集品调查报催促整整和的集 本主要固控持续持续性，如 DNA 精确度评核以及遗传物固固 量评核等。 (4)的集品上新项目:蛋白质 Panel 的的集品位 点及 警 测量 范 围、 警 测量 容 器、 警 测量 试 剂， 是 否 为 NMPA 批准常用的的集品盐酸以及 NMPA 获批的 蛋白质亚基资讯，或研究室自建的集品( laboratory de⁃ veloped tests，LDTs) 盐酸、的集品方法有、的集品以内、警 测量也就是说(LoD)等。 (5)的集品珠果及变异解读:对 蛋白质变异的的集品珠果进行时解读，如警出的蛋白质 改进型、变异珠果、生殖细胞变化持续持续性、的集品珠果的病原 持续性评定、药物资讯及药理学含意、变异解读援引的 供参看等。 (6)标有的集品方法有的研究室内部检验 证珠果，的集品即便如此及不确布持续性，进一步的集品的 建言。

蛋白质变异的定名

对蛋白质变异的描述不必遵循 一定的原则和规章，举荐常用全人类蛋白质组变异联合会 定名范本(www.hgvs.org)，蛋白质同上达本的为了让建言辅以用蛋白质座参看蛋白质组序列类似数据库( Locus Reference Ge⁃ nomic， https:/ /www.lrg⁃sequence.org) 不属于的蛋白质同上达本或者多个国际间类似数据库算是的主要蛋白质同上达本。 对遗传持续性珠直肝癌相山海蛋白质变异的详述，建言以美国医学免疫学学院( American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG;https:/ / www.acmg.net)范本为国际标准，在的集品珠果之中参见具体的变异亚基资讯，还包括蛋白质名称、所参看的全人类蛋白质组原版本号、蛋白质同上达本参看序列原版本号、核苷酸变异、变异、氨基酸 / 核苷酸序号、等位蛋白质杂合持续性、生殖细胞E及座标等等。

药理学含意的解读和批注

对于体蛋白变异，辅以用评定执行的方式 效合伴随检检验、药理学范本、类似数据库或文献珠论，可 以将体蛋白蛋白质变异可分药理学含意完全一致(I 级)、有潜在药理学含意(II级)、药理学含意不完全一致(III 级) 和良持续性或可能会良持续性变异( IV级) 。 研究室只能成立不属于及评定和调查报催促的 SOPs，SOPs 不必至少还包括两 个总体:(1) 对体蛋白蛋白质变异进行时评定的时序; (2)在日常的集品之中调查报催促哪一级或哪几级变异亚基。 评定的时序不必有记录下来，还包括珠论可能的范本、文献、 类似数据库、珠论类别、评定珠果等。 药理学珠论决定牙 变亚基评定，可根据《测量序遗传物固高效率药理学规章化 不必用北京专家认同》发同上的体蛋白变异亚基和临 床珠论可分不限 4 级。

对胚系变异的的集品

除了之中外医疗范本及 重要供参看外，外 Online Mendelian Inheritance in Man (http:/ /omim.org)和美国 ACMG 可参看。 ACMG 范本将变异亚基病原持续性的类别可分病原、疑 故称病原、药理学含意未明、起因于良持续性和良持续性 5 个类别。 调查报催促之中不必参见与遗传持续性珠直肝癌(如 FAP、Lynch 效 合征等)相山海的病原以及起因于病原变异，并对变异 的病原持续性进行时分析解读[28] 。

含意不明亚基的执行

无论是体蛋白 变异，或是胚系变异，都假定含意不明亚基。 科学研究 室需拟订相山海财政政策用来确布是否调查报催促或者不调查报催促 药理学含意不明的亚基，并附上详述和参看类似数据库， 并且要在调查报催促之中注明本研究室出具药理学调查报催促的 应该。

DPYD 的集品珠果

之中等代谢改进型症状，不必基于 活持续性分值减少起始剂量;慢代谢改进型不必避祸仍要常用氟尿嘧 啶及其前体药物。 UGT1A1 的集品珠果之中，UGT1A1∗28 和∗6 为纯合变异改进型或双杂合变异改进型的症状不必减少 伊立替康的剂量，举荐剂量为 150 mg / m2 。

低数量级变异珠果的执行

对抽的集进行时 NGS 警 测量时如出现较低数量级的变异珠果( 一般来说组织起来学抽的集少于 5%，肾脏抽的集少于 1%或少于的集品 LoD)时，建 议效合评核 NGS 科学研究游戏平台持续性能、遗传物固深度以及 蛋白分之一等状况效合顾虑。 之外对于靶向病患相 山海的蛋白质建言常用其他的集品方法有进行时进一步检验证 确认(如 Sanger，dPCR 等)。

坚称同意

建言缺少症状笔迹或者Skype原版的坚称书。

调查报催促堆栈

研究室不必根据的集品上新项目，给出对不必 的的集品调查报催促堆栈(同上 7)，并形如此一来 SOP 文件。 堆栈之中 不必完全一致参见的集品调查报催促之中不必缺少的资讯，如症状理论上 资讯、抽的集资讯、的集品资讯、的集品珠果、珠果解释、实 检验室资讯、的集品方法有的即便如此以及其他内容等。

类似出处

之中国抗癌联合会靶向病患专业知识特别委员会.珠直肝癌分子的集品测量序遗传物固之中国专家认同 .药理学学杂志 2021 年 3 月第 26 卷第 3 期 Chinese Clinical Oncology，Mar. 2021，Vol.26，No.3